ความปลอดภัยในห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยา: ละอองลอย การปั่นเหวี่ยง และการกำจัดเชื้อ

การปฏิบัติงานด้านจุลชีววิทยาอาจก่อให้เกิดอันตรายที่มองไม่เห็นซึ่งการตรวจสอบด้วยสายตาตามปกติอาจมองข้ามไป ละอองลอยที่มีเชื้อก่อโรค ความผิดพลาดของเครื่องปั่นเหวี่ยง และการขจัดการปนเปื้อนที่ไม่เพียงพอ จัดเป็นสาเหตุที่พบบ่อยที่สุดที่ทำให้เชื้อทางชีวภาพหลุดรอดจากการควบคุม คู่มือฉบับนี้ครอบคลุมถึงแนวทางการเตรียมตัวที่ดี วิธีการรับมือเมื่อเกิดเหตุการณ์ไม่คาดคิด และสิ่งที่ห้องปฏิบัติการในไทยจำเป็นต้องทราบเกี่ยวกับการจัดการของเสียและการปฏิบัติตามกฎระเบียบที่เกี่ยวข้อง

ละอองลอยในห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยา: ทำไมจึงสำคัญและจะควบคุมได้อย่างไร

ละอองลอยที่มีเชื้อก่อโรคเป็นหนึ่งในอันตรายที่ถูกละเลยมากที่สุดในการทำงานจุลชีววิทยาทั่วไป ต่างจากการหกของสารที่มองเห็นได้ ละอองลอยไม่มีสัญญาณเตือนล่วงหน้าเมื่อเกิดการสัมผัส อนุภาคที่แขวนลอยในอากาศสามารถถูกสูดดมเข้าไปได้โดยตรง และสามารถตกลงบนพื้นผิวโต๊ะ อุปกรณ์ และชุดป้องกัน ทำให้เกิดการปนเปื้อนที่ขยายออกไปนอกพื้นที่ทำงานเดิม

ขั้นตอนปฏิบัติหลายอย่างเกี่ยวข้องโดยตรงกับการสร้างละอองลอย เช่น การใช้คลื่นความถี่สูง (Sonication) การทำให้เป็นเนื้อเดียวกัน (Homogenization) และการปั่นเหวี่ยง ซึ่งมักระบุในแนวทางความปลอดภัยทางชีวภาพว่าเป็นกิจกรรมที่ทำให้เกิดอนุภาคในอากาศ งานวิเคราะห์วินิจฉัยเพิ่มความเสี่ยงมากขึ้นเนื่องจากมีการจัดการตัวอย่างที่ไม่ทราบองค์ประกอบบ่อยครั้ง การรวมกันของอนุภาคที่มองไม่เห็น ความเสี่ยงในการสูดดม และความสามารถในการแพร่กระจายของละอองลอย ทำให้การควบคุมละอองลอยเป็นหัวใจสำคัญของความปลอดภัยห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยา

แนวทางการควบคุมละอองลอยแบบเป็นลำดับชั้น

ไม่มีมาตรการเดียวที่สามารถขจัดความเสี่ยงจากละอองลอยได้โดยสิ้นเชิง แนวทางที่แนะนำคือการสร้างการป้องกันเป็นชั้นๆ โดยเริ่มจากมาตรการที่จัดการกับแหล่งกำเนิดโดยตรง

ชั้นแรกคือการลดอันตราย หากเนื้องานอนุญาต การใช้เชื้อสายพันธุ์ที่ลดความรุนแรงลงหรือวัสดุที่ทำให้อ่อนฤทธิ์แล้วจะช่วยลดผลกระทบหากเกิดการหลุดรอด แม้ว่าอาจทำไม่ได้เสมอไป แต่ก็ควรพิจารณาในขั้นตอนการวางแผน

มาตรการทางวิศวกรรมเป็นชั้นถัดไป ตู้กรองอากาศบริสุทธิ์ (Biological Safety Cabinet) เป็นเครื่องมือควบคุมหลักสำหรับงานที่ต้องเปิดภาชนะที่มีวัสดุติดเชื้อ สำหรับการปั่นเหวี่ยง การใช้หัวปั่นแบบปิดผนึก (Sealed rotor heads) และถ้วยนิรภัย (Safety cups) ช่วยกักเก็บละอองลอยที่อาจหลุดรอดระหว่างทำงาน คุณลักษณะการออกแบบสถานที่ รวมถึงการแยกพื้นที่ทำงานและการมีพื้นที่ขจัดการปนเปื้อนเฉพาะ จะช่วยสนับสนุนการกักเก็บในระดับที่กว้างขึ้น

การควบคุมทางบริหารจัดการเป็นสิ่งที่เพิ่มเติมจากมาตรการวิศวกรรม ซึ่งรวมถึงขั้นตอนการปฏิบัติงานมาตรฐาน (SOP) นโยบายจำกัดการขยายหรือเพิ่มความเข้มข้นของเชื้อโดยไม่จำเป็น การจำกัดการเข้าถึงพื้นที่ และโปรแกรมการฝึกอบรมที่สร้างความสามารถอย่างแท้จริงมากกว่าเพียงแค่เอกสาร ป้ายเตือนที่ชัดเจนช่วยเสริมการควบคุมการเข้าถึงและย้ำเตือนพนักงานถึงอันตรายที่มีอยู่

อุปกรณ์ป้องกันส่วนบุคคล (PPE) เป็นชั้นสุดท้ายของการป้องกัน รวมถึงการป้องกันระบบทางเดินหายใจเมื่อการประเมินความเสี่ยงระบุว่ามีความจำเป็น PPE จะทำงานได้ดีที่สุดเมื่อมาตรการชั้นก่อนหน้าทำงานได้อย่างมีประสิทธิภาพ การพึ่งพา PPE เพียงอย่างเดียวในการจัดการความเสี่ยงจากละอองลอยเป็นสัญญาณว่ามาตรการควบคุมเบื้องต้นต้องการการปรับปรุง

หากห้องปฏิบัติการของคุณมีการตรวจสอบคุณภาพอากาศในสิ่งแวดล้อม MAS-100 NT® Air Sampler จาก Merck ได้รับการออกแบบมาเพื่อการติดตามตรวจสอบจุลินทรีย์ในสภาพแวดล้อมที่มีการควบคุม และสามารถเป็นเครื่องมือที่เป็นประโยชน์สำหรับการตรวจสอบว่ามาตรการการกักเก็บทำงานตามที่คาดหวังหรือไม่

แนวทางการปั่นเหวี่ยงที่ปลอดภัยสำหรับวัสดุติดเชื้อ

การปั่นเหวี่ยงเป็นหนึ่งในขั้นตอนที่ทำให้เกิดละอองลอยมากที่สุดในห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยา และเป็นขั้นตอนที่ความผิดพลาดในการเตรียมตัวเพียงเล็กน้อยอาจนำไปสู่เหตุการณ์การปนเปื้อนครั้งใหญ่ได้ ข่าวดีก็คือปัจจัยเสี่ยงหลักนั้นเป็นสิ่งที่เข้าใจได้ดีและสามารถจัดการได้ด้วยแนวปฏิบัติที่สม่ำเสมอ

สิ่งที่อาจผิดพลาดได้

เครื่องปั่นเหวี่ยงจะสร้างละอองลอยหลักๆ เมื่อการกักเก็บถูกทำลาย วงแหวนปิดผนึกที่ชำรุดหรือหายไป การหกของสารภายในช่องปั่น หรืออุปกรณ์ที่ทำงานผิดปกติ ล้วนส่งผลให้เกิดละอองลอยเมื่อเปิดหัวปั่น แม้จะไม่มีเหตุการณ์รุนแรง ละอองลอยที่เกิดระหว่างทำงานก็สามารถสะสมอยู่ภายในเครื่องปั่นที่ขาดอุปกรณ์กักเก็บแบบปิดผนึก การหกหรือการหลุดรอดใดๆ ระหว่างหรือหลังการปั่นเหวี่ยงมีความเสี่ยงต่อการสูดดมและการปนเปื้อนพื้นผิวเช่นเดียวกับที่อธิบายไว้ในส่วนก่อนหน้า

ก่อนเริ่มงาน: การเตรียมตัวเพื่อป้องกันปัญหา

ความปลอดภัยของเครื่องปั่นเหวี่ยงเริ่มต้นจากการตรวจสอบและการตั้งค่า ไม่ใช่ที่ปุ่มเริ่มทำงาน

• ตรวจสอบวงแหวนปิดผนึกของถ้วยปั่นก่อนการใช้งานทุกครั้ง หากวงแหวนเสียหายหรือเสื่อมสภาพ จะทำให้การกักเก็บลดลงและควรเปลี่ยนใหม่ก่อนนำไปใช้กับวัสดุติดเชื้อ
• ถ่วงสมดุลหลอดตัวอย่างโดยเติมสารให้ได้ระดับเดียวกันและวางตรงข้ามกันในหัวปั่น ความไม่สมดุลจะเพิ่มความเค้นทางกลและความเสี่ยงต่อการหกภายในเครื่องปั่น
• ใช้ถ้วยนิรภัยหรือหัวปั่นแบบปิดผนึกตามที่การประเมินความเสี่ยงระบุ สิ่งเหล่านี้คือมาตรการทางวิศวกรรมที่ป้องกันการปล่อยละอองลอยหากเกิดปัญหาขึ้นระหว่างทำงาน
• ใช้งานและบำรุงรักษาเครื่องปั่นเหวี่ยงตามคำแนะนำของผู้ผลิต และตรวจสอบให้แน่ใจว่าเฉพาะบุคลากรที่ได้รับการฝึกอบรมอย่างเหมาะสมเท่านั้นที่เป็นผู้ดำเนินการและซ่อมบำรุง

การบรรจุ การทำงาน และการนำตัวอย่างออก

สำหรับวัสดุระดับ BSL-2 ขึ้นไป การบรรจุและนำหัวปั่นเข้าหรือออกจากตู้กรองอากาศบริสุทธิ์เป็นแนวทางปฏิบัติที่แนะนำ ซึ่งหมายความว่าละอองลอยใดๆ ที่อาจเกิดขึ้นเมื่อเปิดหลอดหรือถ่ายโอนตัวอย่างจะถูกกักเก็บโดยตู้แทนที่จะปล่อยออกมาในห้อง

การทำความสะอาดและฆ่าเชื้อเครื่องปั่นเหวี่ยงอย่างสม่ำเสมอเป็นส่วนหนึ่งของการปฏิบัติงานที่ปลอดภัย หากเกิดการหกภายในเครื่องปั่นระหว่างทำงาน จำเป็นต้องทำการขจัดการปนเปื้อนทันทีด้วยน้ำยาฆ่าเชื้อที่เหมาะสม การเลือกน้ำยาฆ่าเชื้อควรเป็นไปตามขั้นตอนความปลอดภัยทางชีวภาพที่ได้รับอนุมัติของสถานประกอบการสำหรับเชื้อที่เกี่ยวข้อง

สำหรับการจัดการตัวอย่างที่สม่ำเสมอและปลอดเชื้อในขั้นตอนจุลชีววิทยาของคุณ เครื่องมืออย่าง NUNC Inoculating Loops จาก Merck ได้รับการออกแบบมาเพื่อลดความเสี่ยงของการปนเปื้อนข้ามระหว่างขั้นตอนการเตรียมตัวอย่างก่อนการปั่นเหวี่ยง

ขั้นตอนการขจัดการปนเปื้อน: การฆ่าเชื้อ การนึ่งฆ่าเชื้อ และการรับมือกับการหกของสาร

การขจัดการปนเปื้อนไม่ใช่ขั้นตอนเดียว แต่เป็นชุดการตัดสินใจว่าจะใช้วิธีใด ในสภาวะใด และจะตรวจสอบอย่างไรว่าได้ผล การตัดสินใจเหล่านั้นมีความสำคัญพอๆ กับการลงมือปฏิบัติจริง

การเลือกวิธีการที่เหมาะสม

จุดเริ่มต้นคือการเลือกวิธีขจัดการปนเปื้อนให้เหมาะสมกับลักษณะงาน: พื้นผิว ของเสียเหลว อุปกรณ์ และวัสดุที่ทิ้งแล้วต่างมีข้อกำหนดที่แตกต่างกัน ระดับการขจัดการปนเปื้อนที่จำเป็นก็แตกต่างกัน ตั้งแต่การทำความสะอาดพื้นฐาน การฆ่าเชื้อระดับกลาง ไปจนถึงการทำให้ปราศจากเชื้อ (Sterilization)

การฆ่าเชื้อทางเคมีขึ้นอยู่กับสภาวะเป็นอย่างมาก น้ำยาฆ่าเชื้อชนิดเดียวกันอาจมีประสิทธิภาพต่างกันมาก ขึ้นอยู่กับความเข้มข้น ระยะเวลาสัมผัส อุณหภูมิ และปริมาณสารอินทรีย์ที่ตกค้างบนพื้นผิวที่จัดการ ความเข้ากันได้ของวัสดุก็สำคัญเช่นกัน น้ำยาฆ่าเชื้อบางชนิดอาจทำลายพื้นผิวอุปกรณ์หรือทิ้งสารตกค้างที่ต้องกำจัดออก ลำดับมาตรฐานคือการทำความสะอาดล่วงหน้าเพื่อลดปริมาณสารอินทรีย์ จากนั้นใช้น้ำยาฆ่าเชื้อตามระยะเวลาสัมผัสที่กำหนด แล้วจึงกำจัดสารตกค้างหากจำเป็น ขั้นตอนของหน่วยงานของคุณควรระบุว่าน้ำยาฆ่าเชื้อใดได้รับอนุมัติสำหรับงานใด

การนึ่งฆ่าเชื้อด้วยไอน้ำ (Autoclaving) ได้รับการระบุในแนวทางความปลอดภัยทางชีวภาพว่าเป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพและเชื่อถือได้ที่สุดสำหรับวัสดุที่ทนความร้อนเมื่อใช้งานอย่างถูกต้อง คำสำคัญคือ "อย่างถูกต้อง" ไอน้ำต้องแทรกซึมผ่านสิ่งที่นำไปนึ่ง ซึ่งขึ้นอยู่กับการบรรจุที่ถูกต้อง การไล่อากาศที่เหมาะสม และการทำตามระดับเวลา อุณหภูมิ และความดันที่กำหนด ประสิทธิภาพควรได้รับการตรวจสอบ ไม่ใช่แค่คาดเดา การใช้ตัวบ่งชี้ทางชีวภาพ (Biological indicators) ที่เหมาะสมจะเป็นการยืนยันว่ารอบการทำงานทำงานตามที่ตั้งใจไว้จริง ไม่ใช่เพียงแค่เครื่องทำงานไปตามรอบเท่านั้น

สำหรับความต้องการการกรองปลอดเชื้อในกระบวนการปลายน้ำ Stericup® E และ Steritop® E sterile filters จาก Merck เป็นทางเลือกสำหรับการกรองวัสดุที่วิธีฆ่าเชื้อด้วยความร้อนไม่เหมาะสม

การรับมือกับการหกทางชีวภาพ

การรับมือกับการหกของสารจะดีเท่ากับขั้นตอนที่เป็นลายลักษณ์อักษรที่รองรับเท่านั้น หากขั้นตอนไม่ได้ถูกร่างและฝึกซ้อมก่อนเกิดเหตุ การตัดสินใจจะเกิดขึ้นภายใต้ความกดดันและข้อมูลที่ไม่ครบถ้วน การเตรียมตัวเป็นสิ่งที่ห้องปฏิบัติการสามารถทำได้จริงมากที่สุด

ปรับระดับการตอบสนองตามความเสี่ยง การหกที่มีโอกาสเกิดละอองลอยต่ำอาจจัดการได้โดยเจ้าหน้าที่ห้องปฏิบัติการที่ผ่านการฝึกอบรมตามขั้นตอนของหน่วยงาน เมื่อสงสัยว่าเกิดละอองลอย เมื่อปริมาณการหกมาก หรือเมื่อเชื้อที่เกี่ยวข้องมีความรุนแรงของโรคสูง จะต้องใช้วิธีรับมือที่ต่างออกไป: อพยพและปิดกั้นพื้นที่ทันที ประเมินบุคลากรที่อาจสัมผัสเชื้อเพื่อรับการตรวจทางการแพทย์ และชะลอการเข้าพื้นที่เพื่อให้ละอองลอยจางลงและตกลงสู่พื้น ติดป้าย "ห้ามเข้า" ให้ชัดเจน และแจ้งหัวหน้างานและเจ้าหน้าที่ความปลอดภัยทางชีวภาพ

หลังเหตุหกของสาร: การรายงานและการทบทวน

เมื่อพื้นที่ปลอดภัยและทำความสะอาดแล้ว งานยังไม่สิ้นสุด ให้รายงานและตรวจสอบเหตุการณ์ตามข้อกำหนดของห้องปฏิบัติการ กฎหมายท้องถิ่น และระดับประเทศ ใช้สิ่งที่ค้นพบเพื่อปรับปรุงการประเมินความเสี่ยงและขั้นตอนการทำงานตามความจำเป็น หากเหตุการณ์เปิดเผยให้เห็นช่องว่างในการฝึกอบรมหรือจุดอ่อนของขั้นตอน ให้แก้ไขก่อนกลับมาดำเนินงานตามปกติ การสอบสวนเหตุการณ์ไม่ใช่แค่การปฏิบัติทางเอกสาร แต่เป็นวิธีที่ห้องปฏิบัติการจะหยุดยั้งไม่ให้เหตุการณ์เดียวกันเกิดขึ้นอีก

การจัดการของเสียและการปฏิบัติตามกฎระเบียบในประเทศไทย: ของเสียติดเชื้อและเชื้อก่อโรคที่มีการควบคุม

ของเสียติดเชื้อในห้องปฏิบัติการในประเทศไทยอยู่ภายใต้ข้อกำหนดทางกฎหมายเฉพาะ และห้องปฏิบัติการที่ทำงานกับเชื้อก่อโรคหรือพิษจากสัตว์ที่มีการควบคุมจะมีภาระผูกพันเพิ่มเติมจากกฎทั่วไป การทำความเข้าใจทั้งสองส่วนจะช่วยให้ห้องปฏิบัติการปฏิบัติตามกฎระเบียบได้อย่างถูกต้องพร้อมไปกับการรักษาความปลอดภัยในการปฏิบัติงาน

ของเสียติดเชื้อ: ข้อกำหนดตามกฎหมายไทย

ข้อกำหนดด้านของเสียติดเชื้อของไทยภายใต้กฎกระทรวงสาธารณสุข ห้ามทิ้งของเสียติดเชื้อในที่สาธารณะ ยกเว้นในสถานที่หรือวิธีการที่ระบุหรือจัดไว้โดยเจ้าพนักงานท้องถิ่น การเก็บรวบรวม ขนส่ง และกำจัดต้องเป็นไปตามเกณฑ์ของกฎกระทรวง หากสถานประกอบการประสงค์จะกำจัดของเสียติดเชื้อด้วยตนเองแทนการผ่านเส้นทางที่ได้รับอนุญาต จะต้องแจ้งเจ้าพนักงานท้องถิ่นเพื่อตรวจสอบระบบการกำจัด และจะดำเนินการได้ต่อเมื่อได้รับอนุมัติแล้วเท่านั้น

วิธีการบำบัดและกำจัดต้องได้มาตรฐานตามที่กำหนด การเผาต้องใช้เตาเผาที่มีการตั้งค่าอย่างเหมาะสมทั้งห้องเผาขยะและห้องเผาควัน โดยต้องผ่านเกณฑ์อุณหภูมิขั้นต่ำและมาตรฐานการปล่อยอากาศเสียที่กระทรวงสาธารณสุขกำหนด วิธีการนึ่งด้วยไอน้ำ ความร้อน หรือวิธีทำให้อ่อนฤทธิ์อื่น ต้องผ่านมาตรฐานประสิทธิภาพทางชีวภาพที่ตรวจสอบโดยใช้ตัวบ่งชี้ทางชีวภาพที่ระบุ เมื่อกำจัดเชื้อตกค้างจนได้มาตรฐานที่กำหนดแล้ว จึงอาจกำจัดเป็นของเสียทั่วไป เว้นแต่จะระบุไว้เป็นอย่างอื่น

ประเภทการคัดแยก รายละเอียดการติดป้าย และข้อกำหนดของภาชนะสำหรับของเสียติดเชื้อ ณ จุดกำเนิด ควรตรวจสอบเทียบกับขั้นตอนการจัดการของเสียที่ใช้ในหน่วยงานของคุณและคำแนะนำด้านกฎระเบียบในปัจจุบัน เนื่องจากรายละเอียดเหล่านี้อยู่ภายใต้ภาระผูกพันด้านการจัดการของเสียในการปฏิบัติงานของคุณ

ภาระผูกพันเพิ่มเติมสำหรับเชื้อก่อโรคและพิษจากสัตว์ที่มีการควบคุม

ห้องปฏิบัติการที่ทำงานกับเชื้อตามรายการในพระราชบัญญัติเชื้อโรคและพิษจากสัตว์ พ.ศ. 2558 จะต้องเผชิญกับข้อกำหนดอีกชั้นหนึ่งนอกเหนือจากกฎของเสียติดเชื้อทั่วไป

ภายใต้พระราชบัญญัติดังกล่าว การครอบครองและการจัดการประเภทที่มีความเสี่ยงสูงสุด (เชื้อก่อโรคกลุ่มที่ 4 และพิษจากสัตว์กลุ่มที่ 3) ถูกจำกัดไว้สำหรับการศึกษาวิจัยที่สอดคล้องกับประกาศกระทรวง หากห้องปฏิบัติการค้นพบว่าเชื้อที่กำลังทำงานด้วยมีความรุนแรงสูงกว่าที่ได้รับอนุญาต มีหน้าที่ต้องแจ้งอธิบดีโดยทันที

พระราชบัญญัติดังกล่าวยังให้อำนาจรัฐมนตรีในการกำหนดหลักเกณฑ์ผูกพันสำหรับการขนส่ง การทำลาย การส่งมอบ และการทำให้เชื้ออ่อนฤทธิ์ บุคลากรที่ปฏิบัติงานภายใต้พระราชบัญญัตินี้อยู่ภายใต้ข้อกำหนดการแจ้งข้อมูล ซึ่งรวมถึงการฝึกอบรมด้านความปลอดภัยทางชีวภาพและความมั่นคงทางชีวภาพพร้อมการทบทวนเป็นระยะ การจัดทำบัญชีรายเดือนของจำนวนเชื้อและพิษที่ครอบครอง การดำเนินมาตรการความปลอดภัยและคุณภาพรวมถึง PPE และการควบคุมการเข้าถึง การรายงานอุบัติเหตุ และการจัดการของเสียติดเชื้อตามกฎหมายของเสียติดเชื้อสาธารณสุข

ห้องปฏิบัติการที่ทำงานกับเชื้อก่อโรคที่มีการควบคุมควรตรวจสอบให้แน่ใจว่าขั้นตอนการทำงานสอดคล้องกับทั้งพระราชบัญญัติและประกาศกระทรวงที่ออกภายใต้นั้น แนวทางความปลอดภัยทางชีวภาพทั่วไปสนับสนุนแนวปฏิบัติที่ดี แต่ไม่สามารถทดแทนการปฏิบัติตามกฎหมายภายใต้กฎหมายไทยได้

สำหรับความต้องการด้านห้องปฏิบัติการชีวภาพและการสนับสนุนวัสดุอุปกรณ์ในประเทศไทย กลุ่มผลิตภัณฑ์ด้านชีวภาพของเรามีพร้อมสนับสนุนความต้องการด้านการวิจัยและการดำเนินงานของคุณ และกลุ่มผลิตภัณฑ์จุลชีววิทยาอุตสาหกรรมของเราครอบคลุมการประยุกต์ใช้ในการผลิตและงานควบคุมคุณภาพ

หากห้องปฏิบัติการของคุณไม่แน่ใจว่าระดับกฎระเบียบใดใช้กับงานของตน จุดเริ่มต้นคือคณะกรรมการความปลอดภัยทางชีวภาพหรือเจ้าหน้าที่ความปลอดภัยประจำหน่วยงานของคุณ พวกเขาสามารถช่วยจัดกลุ่มกิจกรรมของห้องปฏิบัติการเข้าสู่กรอบกฎหมายที่ถูกต้อง และระบุขั้นตอนการอนุมัติหรือการแจ้งข้อมูลที่จำเป็นต้องดำเนินการก่อนเริ่มหรือดำเนินงานต่อไป

คำถามที่พบบ่อย