สารบัญ
ทำไม Protein Purification ถึงมีความสำคัญ
โปรตีนเป็นโมเลกุลที่สำคัญในกระบวนการชีววิทยานับไม่ถ้วน ไม่ว่าจะเป็น enzymatic reaction จนถึง cell signaling การแยกแยะโปรตีนบริสุทธิ์ จาก sample จึงเป็นกระบวนการที่สำคัญ แต่ทว่าอาจจะทำได้ยากเนื่องจาก sample นั้นเต็มไปด้วยการปนเปื้อนจากสิ่งอื่นๆ
Protein purification นอกจากจะเพิ่มปริมาณของโปรตีนที่เป็นเป้าหมาย ยังสามารถช่วยเพิ่มความแม่นยำและความเชื่อถือได้ของการวิเคราะห์ ทำให้งานวิจัยนั้นสามารถที่จะนำมาทดลองซ้ำได้โดยผลการทดลองไม่แกว่ง (reproducibility) เช่น การตรวจวัดเอนไซม์ การศึกษาโครงสร้าง และการค้นพบยา
ความสำคัญของการเตรียมตัวอย่าง (Sample preparation)
คุณสมบัติของตัวกรอง Amicon® Ultra Centrifugal Filter จากเมอร์ค
ตัวกรอง Amicon® Ultra มีคุณสมบัติหลายอย่างที่ออกแบบมาเพื่อให้การ purify และการ concentration ของ โปรตีนเป็นไปอย่างรวดเร็วและมีประสิทธิภาพ:
- ประสิทธิภาพในการกรองขั้นสุด: โดยใช้เทคโนโลยีเมมเบรนที่ Amicon® Ultra filters ช่วยให้การเข้มข้นโปรตีนเป็นไปอย่างรวดเร็วและมีประสิทธิภาพโดยการเก็บรักษาโมเลกุลตามขนาดและน้ำหนักโมเลกุล
- True Dead Stop: คุณสมบัติ “Dead Stop” ช่วยรักษาระดับความเข้มข้นของโปรตีนที่เป็นที่พอใจโดยไม่มีความเสี่ยงต่อการสูญเสียหรือความเสียหายของตัวอย่าง
- Reverse Spin Recovery: หลังจากได้ concentration ของ protein เพียงแค่กลับกล่องตัวอย่างไป หมุนอีกครั้งเพื่อกู้คืนตัวอย่างได้แบบทุกหยด
- Vertical Membranes: Membrane แบบแนวตั้งใน Amicon® Ultra Filters ลดปัญหาการตันและช่วยให้การกรองเร็วขึ้น โดยใช้เวลาเพียงแค่ 10 นาทีก็จะได้ concentration มา
- ความเข้ากันได้กับสารเคมี: Amicon® Ultra filters เข้ากันได้กับสารละลายที่มีคุณสมบัติทางเคมีและระดับ pH ที่หลากหลาย ทำให้มีความยืดหยุ่นและเชื่อถือได้ในการใช้งานหลากหลาย
เลือกตัวกรองที่เหมาะสม
การเลือกตัวกรอง Amicon® Ultra Centrifugal Filter ที่เหมาะสมเป็นสิ่งสำคัญที่จะ optimize การ purify ของ protein โดยสามารถทำตามขั้นตอนนี้เพื่อหาตัวกรองที่เหมาะสมได้:
- กำหนดปริมาณตัวอย่างเริ่มต้น: ประเมินปริมาณของตัวอย่างของคุณเพื่อเลือกขนาดตัวกรองที่เหมาะสม
- ระบุน้ำหนักโมเลกุล: กำหนดน้ำหนักโมเลกุลของโปรตีนเป้าหมายของคุณและเลือกเมมเบรนที่ตัดจากโมเลกุล (molecular weight cut-off) โดยประมาณจะใช้ 2-3 เท่าของโมเลกุลของโปรตีนของคุณ
- เลือกขนาดแพ็ค: Amicon® Ultra centrifugal filter มีให้เลือกในขนาดแพ็คต่างๆ เพื่อให้เหมาะสมกับปริมาณตัวอย่างและการเข้มข้นที่แตกต่างกัน
การใช้งานของ Amicon® Ultra Centrifugal Filter
Amicon® Ultra centrifugal filterมีการใช้งานที่หลากหลายในการทำ Protein Purification หรือ Sample Preparation เช่น:
- ตัวอย่างชีวภาพที่มี antigens, antibodies, enzymes, or nucleic acids.
- การ purify ของส่วนประกอบmacromolecule ที่พบในสารสกัดเนื้อเยื่อหรือ cell lysates
- การแลกเปลี่ยนบัฟเซอร์และ protein dialysis
- การเลือกที่ตัดแยกโปรตีนและการแยกชั้นโปรตีน
Thai 
English